美国abraxis合成除虫菊酯检测试剂盒
适用
Abraxis合成除虫菊酯检测试剂盒适用于定量检测水样中（底下水，表面水，井水）苄氯菊脂和相关的合成除虫菊酯（见后面的交叉反应表）。水样的前处理步骤请看说明书。如果要检测土壤，作物，和食品样品的话请联系本公司索取相关资料。
原理
Abraxis合成除虫菊酯检测试剂盒应用了酶联免疫检测原理测定苄氯菊脂和相关的合成除虫菊酯。测试样品和包被有合成除虫菊酯特异性抗体的磁性颗粒一起加入到一次性测试管中孵育20分钟。然后添加合成除虫菊酯酶结合物。样品中的合成除虫菊酯和合成除虫菊酯酶结合物相互竞争于磁性颗粒上的抗体结合位点。孵育30分钟，在反应中磁场应用于固定测试管中的顺磁颗粒（指结合合成除虫菊酯和酶标苄氯菊脂复合物的磁性颗粒，和它们的初始浓度成正比），同时允许把没有结合的试剂处理掉。在倒掉没有发生反应的试剂后用洗液清洗这些颗粒。通过添加酶底物（过氧化氢）和显色剂（TMB）可以检测到合成除虫菊酯。结合到合成除虫菊酯抗体上的苄氯菊脂酶标物催化底物/显色液混合物产了有色物质。经过30分钟的孵育，加入酸溶液终止稳定反应。因为酶标苄氯菊脂（结合物）和没有标记的合成除虫菊酯（样品）在反应中竞争于抗体位点结合，所以显色的深浅和样品中合成除虫菊酯的浓度成反比。
试剂盒组成
1、包被有合成除虫菊酯抗体的磁性颗粒。
合成除虫菊酯抗体（抗苄氯菊脂单克隆抗体）被包被于磁性颗粒上，这些颗粒悬浮于包含有保护剂和稳定剂的盐性缓冲液中。100测试，1瓶60mL。
2、合成除虫菊酯酶结合物。
HRP标记的苄氯菊脂类似物被稀释在包含有保存剂和稳定剂的盐性缓冲液中。100测试，1瓶30mL。
3、苄氯菊脂标准品
5瓶苄氯菊脂标准品（0.75、2.5、5.0、15.0 ppb)，每瓶2.0 mL，保存于含有保护剂和稳定剂的甲醇溶液中。
4、对照 1瓶2ml
浓度为3.0 ppb 的苄氯菊脂，保存于含有保护剂和稳定剂的甲醇溶液中。
5、稀释剂/零标准
含有保护剂和稳定剂的甲醇溶液，不含有任何可以检测到的苄氯菊脂。100检测，1瓶35mL。
6、显色溶液
含有过氧化氢和TMB的有机碱溶液。100检测，1瓶65mL。
7、终止液
0.5%的稀硫酸溶液，100检测，1瓶60 mL。
8、洗液
加防腐剂的无离子水，100检测，1瓶250 mL
9、测试管
测试管，每包36支，100检测，共3包。
测试步骤
在操作之前一定要仔细阅读以上内容。
1、对于水样可以直接按此说明书处理，如果是其它样品颗粒请联系我公司索取特定的样品处理方法。
2、标记测试管，使标准、样品和对照区分开。
管号 1、2 3,4 5,6 7,8 9,10 11 12 13 14
测试管内容物 Diluent/Zero Standard,
0 ppb Standard1
0.75 ppb Standard2
2.5 ppb Standard3
5.0 ppb Standard4
15.0 ppb Control Sample1 Sample2 Sampe3
3、在对应的测试管中加入250 uL标准，对照或样品。
4、混匀包被有合成除虫菊酯抗体的磁性颗粒溶液，然后每个测试管加入500 uL。
5、涡旋震荡1到2秒，尽量不要产生气泡。
6、在室温下孵育20分。
7、在每个测试管加入250 uL合成除虫菊酯酶结合物。
8、涡旋震荡1到2秒，尽量不要产生气泡。
9、在室温下孵育30分。
10、在磁性分离架分离2分钟。
11、用同样的操作手法轻轻倒出所有测试管中的液体，并轻轻地把剩余液体吸取干净。
12、每个测试管中加入1 mL洗液，涡旋震荡1到2秒，再在磁性分离器上分离2分钟。
13、从分离器上拿起支架，慢慢翻转来倾倒测试管中的液体，动作一定要平缓保证液体是沿着试管的一边持续的流出。一直到支架反了过来的时候放在吸水垫上面使试管壁上的水被吸出。提起来支架然后再放到吸水垫上面，反复操作几次确保试管壁上的液体全部被移除。
14、重复步骤12，13 一次。
15、从分离器上拿下支架，然后每个测试管中加入500 uL的显色液。
16、涡旋震荡1到2秒，尽量不要产生气泡。
17、在室温下孵育30分。
18、在每个测试管中加入500 uL的终止液。
19、在一个干净的测试管中加入1 mL洗液，作为步骤20中的空白。
20、在加入终止液15分钟后，在450nm的分光光度计测定。
结果
手工计算
1、 计算每个标准的吸光度值。
2、 计算每个标准的%B/Bo（每个标准的吸光度值除以 稀释剂/零标准 的吸光度值）。
3、 以每个标准的%B/Bo值的Log 为Y轴，合成除虫菊酯浓度的Ln为X轴作图绘制标准曲线。
4、 把样品或对照的%B/Bo插入到标准曲线就可以计算出结果。 |
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