孔雀石绿(malachite green; MG) 是一种工业用三苯甲烷
(triphenylmehtane)类染料，由于具有抗霉菌及抗格兰氏阳性菌之功效，且价格便宜，所以被广泛运于用养殖渔业之病害防治；当养殖水含有孔雀石绿时，鱼体会快速吸收孔雀石绿进而代谢成为还原型孔雀石绿(Leucomalachitereen; LMG) 而囤积在肌肉中长达数月。近年来有关此类染料的毒理研究发现：孔雀石绿及其主要代谢物还原型孔雀石绿具有多重毒性，包括致癌性、致基因
突变、引起染色体断裂、致畸胎及呼吸道毒性。
依照欧盟标准，鱼肉中所残留之孔雀石绿与还原型孔雀石绿之总合不得超过2ppb (每公斤2微毫克)。现行分析孔雀石绿类的方法有LC-MS及 HPLC，但是这些方法都需要较贵重之仪器及药品，且需要较长的时间或特需训练的人员方可进行分析测试。因此本公司推出了孔雀石绿类酵素免疫检验试剂套组，提供一个分析快速、价钱合理且拥有高敏感度之分析方法。
本公司所推出之孔雀石绿类酵素免疫检验试剂套组可直接检测最小值为0.2ppb之还原型孔雀石绿；或是在使用还原剂后，对相同当量的孔雀石绿进行检测，并对同属三苯甲烷类的结晶紫(Crystal violet; CV)及还原型结晶紫(Leucocrystal Violet; LCV)产生交叉反应，且对几种常用之抗生素及磺胺药类皆无交叉反应。这款免疫检验试剂可用在针对水产内所残留的孔雀石绿进行
测试；试剂判读之cut-off订为0.4ppb，检体之检测值大于0.4ppb 可判为阳性检体，检测值小于0.4ppb则可判为阴性检体。我们仍然建议所有的阳性检体必须由LC-MS做确认分析。
试剂内容
1、 微量测试孔 （microtiter wells）：
微量测试孔：每条8孔，一盘12条
2、 还原型孔雀石绿标准溶液 （LMG standards）：
0 ppb、0.2 ppb、0.5 ppb、1 ppb、2.5 ppb、5 ppb各一瓶，
1 mL / 瓶
3、 样品稀释液 （Sample Diluent）：一瓶，50 mL / 瓶
4、 10倍浓缩清洗液 （10X Washing Solution）：一瓶，50 mL / 瓶
5、 还原型孔雀石绿10倍浓缩抗体 （LMG Antibody (10X)）： 一瓶，1.3 mL
/ 瓶
6、 还原型孔雀石绿抗体稀释液 （LMG Antibody Diluent）：一瓶，13 mL
/ 瓶
7、 10倍浓缩二次抗体（Tracer (10X)）：一瓶，1.2 mL / 瓶
8、 二次抗体稀释液 (Tracer Diluent）：一瓶，13 mL / 瓶
9、 底物溶液（Substrate solution；TMB）：一瓶，12 mL / 瓶
10、 反应终止液 （Stop Solution）：一瓶，13 mL / 瓶
11、 还原剂（Reductant）：一瓶，1g / 瓶
特异性（Specificity）
针对下列药品以1 ppm之浓度与还原型孔雀石绿(LMG)进行交叉反应试验，发现
并没有明显的交叉作用存在。
Clenbuterol Sulfadiazine Sulfaquinoxaline
Salbutamol Sulfamonomethoxine Sulfamethoxazole
Terbutaline Sulfamethazine Sulfanitran
Chloramphenicol Sulfamethoxypyridazine Penicillin G
Gentamicin Sulfadimethoxine Tetracycline
Oxytetracycline Sulfathiazole
Aromatic compounds (aniline, dimethylaniline, benzaldehyde)
而对于同属三苯甲烷类的其它染剂类药品，交叉反应结果为：
药品名称 还原前交叉反应率(%) 还原后交叉反应率(%)
还原型孔雀石绿(LMG) 100% 100%
孔雀石绿(MG) 30% 100%
结晶紫(CV) 10% 200%
还原型结晶紫(LCV) 200% 200%
检品敏感度（Sensitivity）
各类检体之检测敏感度如下：
检品 敏感度（ppb）
鱼类、虾 0.2
回收率（Recovery rate）
鱼类 80-110%
虾 70-100% |
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