辉骏生物具有三年SILAC服务经验，顾客发表在权威期刊J.Proteome Res.上的主体数据出自本公司，提供Arg和Lys的L、M、H三种同位素氨基酸。
一、SILAC概述
SILAC即细胞培养条件下稳定同位素标记技术(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture，SILAC)，其基本原理是在细胞培养时，采用含有轻、中、重同位素型必需氨基酸的培养基进行细胞培养，用于SILAC主要的稳定同位素氨基酸是Lys和Arg, 细胞在传代培养过程中同位素氨基酸将被细胞用于合成蛋白质，细胞经传代培养5-6代后，细胞的所有蛋白质将被同位素标记，等量混合标记的蛋白质后经过SDS-PAGE分离和质谱分析，通过比较一级质谱图中三个同位素型肽段的面积大小进行相对定量，同时二级谱图对肽段进行序列测定从而鉴定蛋白质。
由于SILAC标记技术是体内标记技术，几乎不影响细胞的功能，同时灵敏度高，因此其在蛋白质组学相关领域中得到了广泛的应用，如比较蛋白质组学，蛋白质与蛋白质相互作用，蛋白质与DNA相互作用，蛋白质与RNA相互作用等领域。
二、与体外标记技术相比，SILAC属于体内标记，具有以下技术优势:
1、高通量，可同时鉴定并定量数百至数千种蛋白质；
2、定量精确，降低由于样品制备不同而造成的实验差异；
3、线性定量范围广；
4、灵敏度更高，蛋白质需要量明显减少；
5、标记采用的是体内标记技术，更接近样品真实状态。
三、SIALC技术服务流程
四、SILAC技术服务内容
1、细胞同位素标记；
2、样本制备与定量；
3、SDS-PAGE分离；
4、胰酶酶切后液相分离和质谱分析；
5、数据库检索；蛋白质定量分析；
6、相关生物信息学分析；
7、实验报告提交。
五、送样须知
1、技术咨询：在您开始实验之前，本公司将为您竭诚提供最有效的SILAC实验设计方案，本公司提供Lys和Arg均为L、M 、H标记的氨基酸。
2、为了保证SILAC实验能顺利进行，样品寄送需满足以下要求：
基本要求：SILAC实验仅适用于能在SILAC培养基中培养的材料，具体情形请咨询本公司。
运输要求：液氮或干冰保存寄送，广州本地客户可上门收样。
注：样本应避免各类污染和反复冻融。
六、实验报告内容
1、蛋白定鉴定和SILAC定量分析结果；
2、顾客指定蛋白质对应的质谱峰图；
3、SILAC实验完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
七、SIALC技术服务案例
八、服务周期及收费标准： 欢迎登陆： www.fitgene.com 服务热线 400-699-1663
十、质量承诺
1、严谨的SILAC实验设计方案确保定量分析结果可靠；
2、提供客观的SILAC实验分析结果。 |
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